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El retrovius puede utilizarse para infectar una serie de líneas celulares de mamífero, con el resultado de la integración del gen clonado, 84P2A9, en las líneas celulares huésped. Para generar una proteína recombinante de 84P2A9 en un sistema de expresión de baculovirus, se clonó el cDNA de 84P2A9 en el vector de transferencia de baculovirus pBlueBac 4.

El baculovirus se extrajo entonces del sobrenadante celular y se purificó mediante ensayo en placa. La proteína recombinante de 84P2A9 se generó entonces mediante la infección de células de insecto HighFive InVitrogen con el baculovirus purificado.

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La proteína recombinante de 84P2A9 puede detectarse utilizando anticuerpos antiP2A9. La proteína 84P2A9 puede purificarse y utilizarse en varios ensayos basados en células o utilizarse como inmunógeno para generar anticuerpos policlonales y monoclonales específicos antiP2A9.

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Estos marcadores transcripcionales contienen sitios de unión consenso para factores de transcripción conocidos que discurren corriente abajo de las rutas de transducción de señales. Los marcadores y ejemplos de los factores de transcripción asociados, rutas de transducción de señales, y estímulos de activación se listan a continuación.

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La actividad luciferasa, un indicador de la actividad transcripcional relativa, se mide mediante la incubación de los extractos celulares con el sustrato luciferina y se monitoriza la luminiscencia de la reacción en un luminómetro. Las proteínas inmunogénicas incluyen proteínas recombinantes de 84P2A9 producidas en bacterias y baculovirus, y proteínas de fusión de Fc de IgG humano expresadas en enzima marcadora del cancer de prostata.

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Se toman muestras de sangre cada días después de la inmunización para monitorizar la titulación y especificidad de la respuesta inmune. En un protocolo específico típico, se sintetiza una proteína de fusión de glutatión-S-transferasa GST abarcando una proteína de 84P2A9 y se utiliza como inmunogéno.

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La función de 84P2A9 puede evaluarse en células de mamíferos utilizando aproximaciones in vitro.

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Para la expresión en mamíferos, el 84P2A9 puede clonarse en diferentes vectores apropiados, lo que incluye pcDNA 3. La expresión de 84P2A9 puede monitorizarse utilizando anticuerpos antiP2A9 véanse los Ejemplos 4 y 9.

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Las líneas celulares de mamíferos que expresan 84P2A9 pueden analizarse en varios ensayos in vitro e in vivolo que incluye proliferación celular en cultivo de tejidos, activación de señales apoptóticas, formación de tumores en ratones SCID, e invasión in vitro utilizando un sistema de cultivo de invasión de membrana SCIM Welch et al.

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La función de 84P2A9 puede evaluarse utilizando tecnología de RNA antisentido acoplado a varios ensayos funcionales descritos antes, por ejemplo crecimiento, invasión y migración. Los oligonucleótidos de RNA antisentido pueden introducirse en células que expresan 84P2A9, evitando de esta manera la expresión de 84P2A9.

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En las células control y las enzima marcadora del cancer de prostata contienen el RNA antisentido puede analizarse su potencial de proliferación, invasión, migración, apoptótico y transcripcional. Se puede valorar el efecto local así como el sistémico de la pérdida de expresión de 84P2A9. El efecto de la proteína 84P2A9 sobre el crecimiento celular tumoral puede evaluarse in vivo mediante la sobreexpresión génica en ratones portadores de tumores.

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Se pueden utilizar al menos dos estrategias: 1 la expresión constitutiva de 84P2A9 bajo la regulación de un promotor, como un promotor constitutivo obtenido de los genomas de virus como el virus del polioma, virus de la viruela aviar UK 2. La localización celular de 84P2A9 puede evaluarse utilizando técnicas de fraccionamiento subcelular ampliamente utilizadas en biología celular Storrie Enzima marcadora del cancer de prostata, et al. Methods Enzymol.

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Las líneas celulares de próstata o testículos pueden separarse en fracciones nucleares, citosólicas y de membrana. La expresión de 84P2A9 en las diferentes fracciones puede valorarse utilizando técnicas de Western blot.

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Las células transfectadas pueden separase y someterse a un protocolo de fraccionamiento subcelular diferencial tal como se ha descrito previamente Pemberton, P. Un anticuerpo o fragmento del mismo que se une inmunoespecíficamente a una proteína 84P2A9 que comprende la secuencia del Id.

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Breve descripción de las figuras La Fig. Descripción detallada de la invención A no ser que se definan de otro modo, todos los términos de la materia, las notaciones y otros términos científicos o terminología utilizada aquí, se pretende que tengan enzima marcadora del cancer de prostata significado que normalmente se entiende entre los expertos en la materia a los que va dirigida esta invención.

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Polipéptidos 84P2A9 Otro aspecto de la presente invención proporciona proteínas relacionadas con 84P2A9 y fragmentos de polipéptido de las mismas. Anticuerpos de 84P2A9 Otro aspecto de la invención proporciona anticuerpos que se unen enzima marcadora del cancer de prostata las proteínas y polipéptidos relacionados con 84P2A9.

Inhibición de la transcripción o traducción de 84P2A9 Dentro de la segunda clase de aproximaciones terapéuticas, la invención proporciona varios métodos y composiciones para inhibir la transcripción del gen 84P2A9.

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Consideraciones generales de las estrategias terapéuticas Las tecnologías de transferencia génica y terapia génica pueden utilizarse para la liberación de moléculas polinucleotídicas terapéuticas es decir, moléculas antisentido, ribozimas, polinucleótidos que codifican intracuerpos y otras moléculas inhibidoras de 84P2A9 en células tumorales que sintetizan 84P2A9.

Ejemplos Se describen e ilustran en profundidad varios aspectos de la invención por medio de los diferentes ejemplos que siguen a continuación, ninguno de los cuales pretende limitar el alcance de la invención. Se discuten enzima marcadora del cancer de prostata continuación los sistemas específicos de mamífero.

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El anticuerpo o fragmento del mismo de la reivindicación 1, en el que el agente citotóxico es un isótopo radiactivo, un agente quimioterapéutico o una toxina.

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La utilización de un anticuerpo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para la preparación de un medicamento para la liberación de un agente citotóxico en una célula cancerosa que expresa una proteína 84P2A9 Id. Un vector viral que comprende el polinucleótido del Id.

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Hable con su médico acerca de las posibles ventajas, desventajas y limitaciones de tales pruebas. Para realizar la ecografía transrectal TRUSse lubrica y coloca una pequeña sonda de aproximadamente el ancho de un dedo en su recto.

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Los médicos también pueden hacer pruebas para determinar qué tratamientos podrían funcionar mejor. Durante la biopsia, el médico toma una pequeña muestra de tejido para hacerle pruebas en un laboratorio.

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No todas las pruebas mencionadas a continuación se utilizan con frecuencia para todas las personas. Su médico puede considerar estos factores al elegir una prueba de diagnóstico:. Pruebas de biomarcadores.

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Un biomarcador también se puede denominar marcador de tumor. Un médico inserta una sonda en el recto para tomar una fotografía de la próstata usando las ondas sonoras que rebotan contra la próstata.

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La TRUS se realiza generalmente al mismo tiempo que la biopsia. Una biopsia en inglés es la extirpación de una cantidad pequeña de tejido para examinarlo a través de un microscopio. Esto enzima marcadora del cancer de prostata hace para garantizar que se obtenga una buena muestra para examinarla.

Luego un patólogo analiza la s muestra s bajo un microscopio.

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Un patólogo es un médico que se especializa en interpretar pruebas de laboratorio y evaluar células, tejidos y órganos para diagnosticar enfermedades. Generalmente, una persona puede realizarse este procedimiento en el hospital o en el consultorio del médico sin necesidad enzima marcadora del cancer de prostata pasar allí la noche. Posteriormente, el paciente se somete a una ecografía de la próstata.

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Una biopsia con fusión de MRI solo debe realizarla alguien que tenga experiencia en el procedimiento. Gammagrafía ósea de cuerpo entero. La gammagrafía ósea usa un trazador radiactivo tecnetio 99 para examinar el interior de los huesos.

El trazador se inyecta en una vena del paciente. Una exploración por CT se puede utilizar para medir el tamaño del tumor. En ocasiones, antes de la exploración se administra un tinte especial denominado medio de contraste, a fin de obtener mejores detalles en la imagen.

Este tinte se puede inyectar en una vena del paciente o puede administrarse en forma de líquido para tragar. Sin embargo, es posible que escuche al médico hablar de este procedimiento como simplemente una PET.

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Se inyecta en el cuerpo del paciente una pequeña cantidad de una sustancia radioactiva. Esta sustancia es absorbida por las células que utilizan la mayor cantidad de energía.

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Otras sustancias bajo estudio, incluyen acetilcolina, fluciclovina y el antígeno de membrana específico de la próstata prostate specific membrane antigen, PSMA. Una MRI se puede usar para medir el tamaño del tumor.

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Esto se denomina determinación del estadio. La siguiente sección de esta guía es Estadios y grados. Explica el sistema que los médicos usan para describir el alcance de la enfermedad y cómo las células cancerosas se ven bajo el microscopio.

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Solicite revisar los resultados del informe de patología con su equipo de atención médica. Ilustraciones médicas.

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